electrophorèse des proteines electrophorese
electrophorèse des proteines electrophorese
La technique d’Electrophorèse
Est fondé sur le déplacement d’ions de molécules ayant perdu leur neutralité électrique sous l’effet
d’un champ électrique du fait de leurs caractéristiques propres et en fonction des conditions
de l’électrophorèse, ces ions auront des vitesses de migration différentes ils vont donc
se séparer les uns des autres, les molécules anioniques chargées négativement migrent vers
l’anode chargé positivement et les molécules cationiques chargées positivement se déplacent
vers la cathode chargé négativement. L’électrophorèse en gel de polycrylamide pour la séparation
, des protéines contenant de l’auryl sulfate de sodium est appelée SDS PAGE
: acronyme anglophone de Sodium 2D Styl Sulfate polyacromyte gel elecrophreisis
cette technique permet de séparer les protéines selon leur poids moléculaire . la matrice est
créée par la polymérisation d’acrylamide et de bi-acrylamide , la grosseur des ports est
variable et peut être contrôlée il s’agit d’une méthode dénaturante en raison de l’ajout
de l’uryl de sulfate de sodium ou SDS, dans ce gel dénaturant en retrouve SDS qui
se lie aux protéines selon un ration constant : une molécule de SDS pour 2 acides aminé
s, le SDS est un détergent fort possédant une longue queue hydrocarboné hydrophobe
et une extrémité chargée négativement il interagit avec les protéines par sa portion
hydrocarboné en liant la région hydrophobe en se liant à la protéine le SDS empêche
son repliement et lui confort une charge nette négative cela signifie que seul le poids moléculaire
apparent et non réel des protéines sera le facteur e leur séparation ceci permet sa migration
dans la matrice à l’aide d’un courant électrique et la séparation des protéines s’effectue uniquement
en fonction de leur poids moléculaire, les protéines qui ont un petit poids moléculaire migreront
plus loin que les grosses, lorsque les protéines ont été séparés leur visualisation
peut être effectuée en les colorant directement par le bleu du kommassi ou par du nitrate d’argent
electrophorèse des proteines electrophorese
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